Лечение вторичного остеоартроза крупных суставов у собак

Динамика изменения синовиальной жидкости, суставного хряща и опорно-двигательной функции конечности при лечении вторичного остеоартроза крупных суставов у собак препаратом «Хионат» производства компании «Байер», Германия

Введение

Российский университет дружбы народов
Институт ревматологии РАМН
Ягников С.А., Кулешова Я.А., Захарова М.М., Роденска-Лоповок С.Г.

Остеоартроз (ОА) - это дегенеративно-дистрофические изменения суставного хряща, склеротические изменения субхондральной кости, гипертрофия капсулы сустава и реактивный синовит 1,2,5,6. По происхождению ОА бывает первичным и вторичным. Этиология первичного ОА остается недостаточно изученной. Вторичный ОА наиболее часто развивается у крупных и гигантских пород собак на фоне дисплазии тазобедренных (ТБС) и локтевых суставов, расслаивающего остеохондрита головки плечевой кости, разрыва передней крестообразной связки (ПКС) и внутрисуставных переломов. При ревизии суставной полости у животных с вторичным ОА отмечаются дегенеративные изменения суставного хряща в виде узурации его поверхности, хондроматозные разрастания и многократное увеличение объема синовиальной жидкости (СЖ), что приводит к перераздражению чувствительных рецепторов капсулы сустава, усилению боли и хромоты животного.

Наиболее широко используемым методом лечения вторичного ОА является проведение курса (ов) медикаментозного лечения, включающего нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП), препараты замедленного действия («хондропротекторы») и анаболические стероиды. Основным препаратами при лечении ОА являются НПВП. Однако их применение у 14-22 % животных вызывает развитие НПВП - гастропатии, которая характеризуется язвенной болезнью, меленой и гематомезисом ^5.10 . Поэтому в последние годы широкое применение в ветеринарной медицине стали приобретать препараты замедленного действия и пищевые добавки, действующим веществом которых является глюкозаминогликаны ^5'610 . Но большинство из предлагаемых препаратов и, тем более, кормовых добавок не были тестированы на эффективность лечения вторичного ОА. А показания к лечению заболеваний опорно-двигательного аппарата составлены только на основании того, что эти препараты и кормовые добавки содержат в своем составе те или иные гликозаминогликаны. Цель исследования: изучить динамику изменения показателей СЖ, суставного хряща и динамику изменения опорно-двигательной функции конечности у собак с вторичным ОА на фоне лечения препаратом «Хионат» (Байер АГ, Германия).

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

• Изучить состав СЖ:
  1. у собак без патологии опорно-двигательного аппарата;
  2. у собак с вторичным ОА на фоне разрыва ПКС, и расслаивающего остеохондрита головки плечевой кости;
  3. у собак с моделированным ОА коленных суставов;

• Изучить динамику показателей СЖ у собак с моделированным ОА коленных суставов на фоне лечения препаратом «Хионат» и в контрольной группе.
• Изучить регенерацию суставного хряща у собак с моделированным ОА коленных суставов на фоне лечения препаратом «Хионат» и в контрольной группе.
• Изучить биомеханику ходьбы у собак с вторичным ОА на фоне лечения препаратом «Хионат» и в контрольной группе.

Материалы и методы

Работа была выполнена на базе Российского университета дружбы народов (РУДН) и Института ревматологии РАМН.

За период февраль-март 2004г. исследование СЖ было проведено у 10 собак без патологии опорно-двигательного аппарата, у 12-и с разрывом передней крестообразной связки (ПКС), причем у 8-ми собак без симптома переднего выдвижного ящика, и у 2-х животных с расслаивающим остеохондритом головки плечевой кости.

В эксперименте у 7 собак вторичный остеоартроз коленных суставов моделировали по Ломницкому ² . Всем животным выполняли латеральную артротомию. В области мыщелков бедренной кости и межмыщелкового желоба формировали дефекты суставного хряща до субхондральной кости, что соответствует 4-ой фазе ОА. В послеоперационном периоде проводили антибиотикотерапию препаратом фторхинолонового ряда (ципрофлоксацин в дозе 15 мг на кг массы тела, 2 раза в сутки, в течение 5 суток) и обработку швов спреем Террамицин. На 7 сутки после начала эксперимента у собак выполняли артроцентез с аспирацией СЖ и последующим введением препарата «Хионат» трем собакам внутривенно в объеме 2 мл, трем другим - интраартикулярно по 1 мл препарата в каждый сустав. В последующем аспирацию СЖ и введение препарата проводили раз в 7 суток, в течение четырех недель. После введения препарата через час, три, восемь и двадцать четыре часа исследовали клинический и биохимический анализы крови. Одно животное с моделированным вторичным ОА составило группу контроля.

Исследование СЖ проводили на базе Института ревматологии по общепринятой методике - комплексное исследование СЖ. Определяли физические свойства СЖ (количество, цвет, прозрачность, вязкоэластичность, плотность муцинового сгустка), общий цитоз, клеточный состав (синовиоцитограмма) и биохимические свойства (содержание общего белка, глюкозы, наличие кристаллов).

Вязкость СЖ определяли по длине муциновой нити (низкая - до 1см; средняя - до 5см; высокая - свыше 5см).

Плотность муцинового сгустка оценивали методом добавления капли СЖ в 3 - 5% уксусную кислоту. Определяли 4 степени плотности (плотный; умеренно плотный; рыхлый; умеренно рыхлый).

Для определения клеточного состава мазки нативной СЖ фиксировали по Май-Грюнвальду с последующим окрашиванием по Нохту. Содержание общего белка определяли Биуреттовым методом. В случае, аспирации из сустава мутной СЖ её предварительно подвергали центрифугированию. Содержание глюкозы в СЖ определяли глюкозооксидантным методом. Кристаллы выявляли методом поляризационной микроскопии на микроскопе Палам Л-213-М.

Регенерацию суставного хряща с моделированным ОА на фоне лечения препаратом «Хионат» и в контрольной группе изучали в биоптатах суставного хряща и субхондральной кости, взятых с поверхности суставного хряща на границе здоровая кость/дефект через 30 и 60 суток после формирования дефекта. Применяли гистологические (окраска гематоксилином и эозином и пикрофусцином по ван Гизон) и гистохимические (окраска толуидиновым синим) методы исследования.

После экспериментальных исследований проводилась клиническая апробация препарата на 14 собаках с расслаивающим остеохондритом головки плечевой кости и разрывом передней крестообразной связки после оперативного лечения. Для объективного анализа восстановления опорно-двигательной функции конечности у животных до и после проведения курса лечения препаратом «Хионат» и в контрольной группе проводили педографическое исследование ходьбы. На педографе определяли ряд функциональных параметров: силу, площадь опоры стопы и/или кисти, среднее и максимальное удельное давление под стопой, зоны перегрузки.

Обработку, полученных при исследовании СЖ, данных проводили методами вариационной статистики, эффективность лечения оценивали по критерию Стьюдента.

Результаты исследований

У собак после введения препарата Хионат клинические и биохимические показатели крови не имели отклонений от показателей нормы.

СЖ, полученная из суставов 10 собак без патологии ОДА, была прозрачной и практически бесцветной; из крупных суставов (коленный) удавалось аспирировать не более 1 мл. СЖ имела: высокую вязкость, плотный муциновый сгусток. Цитоз колебался в пределах 4,0 - 10,0 х 10 ⁹ /л. В клеточном составе нормальной СЖ преобладали лимфоциты (60,7±0,52%), оставшуюся часть клеток представляли мононуклеарные клетки (39,3±0,56%). Полиморфноядерные нейтрофилы (ПЯН) отсутствовали. Общий белок составлял 15,8±0,60 г/л, глюкоза - 4,2±0,05 µM/л. В нормальной СЖ не обнаруживались какие-либо посторонние примеси, частицы взвеси или кристаллические образования (табл. 1).

Табл. 1. Средние показатели нормальной СЖ у собак без патологии

Показатели	n=10 (М±m)	Показатели	n=10 (М±m)
Количество	≤1,0	Цитоз, (х 10 9 / л)	4,0-10,0
Цвет	Бледно-розоватая (2) - Бесцветная (8)	Синовиоцитограмма, %: ПЯН Лимфоциты Мононуклеары	Нет 60,7±0,52 39,3±0,56
Прозрачность	Прозрачная (10)	Общий белок, г/л	15,8±0,60
Вязкость	Высокая (10)	Глюкоза,  µМ/л	4,2±0,05
Плотность МС	Умеренно плотный (1) - Плотный (9)	Кристаллы	Нет

ОДА У собак с вторичным ОА, развившимся на фоне разрыва ПКС (n=12) и расслаивающего остеохондрита головки плечевой кости (n=2), СЖ характеризовалась увеличением объема. СЖ была светло-желтого цвета (n=9), полупрозрачной (n=13), со средней (n=8) или низкой (n=6) вязкостью и умеренно рыхлым муциновым сгустком (п=12). Для синовиоцитограммы было характерно появление ПЯН (1,5±0,40%). Содержание общего белка и глюкозы было соответственно 22,3±0,81 г/л и 4,3±0,06 µМ/л. Кристаллические образования не определялись (табл.2).

Табл. 2. Средние показатели СЖ при вторичном ОА у клинических больных

Показатели	n=14 (М±m)	Показатели	n=14 (М±m)
Количество	>>1,0	Плотность МС	Рыхлый (2) - Умеренно рыхлый (12)
Цвет	Слегка розоватая (5) -Светло-желтая (9)	Цитоз, (х 10 9/л)	1,5-7,5
Прозрачность	Полупрозрачная (13) - Прозрачная с неб. взвесью (1)	Синовиоцитограмма, %: ПЯН Лимфоциты Мононуклеары	1,5±0,40(<12%) 64,4±2,29 33,4±1,32
Вязкость	Низкая (6) - Средняя (8)	Общий белок, г/л	22,3±0,81
		Глюкоза,  µM/л	4,3±0,06
		Кристаллы	Нет

Показатели СЖ, полученной у экспериментальных собак на 7 сутки после моделирования вторичного ОА коленных суставов, были следующими: объем СЖ - более 1 мл; вязкость - низкая (n=7); цвет - от светло-желтого (n=4) до бледно-розоватого (n=3); муциновый сгусток - рыхлый (n=7). Общий цитоз составил 4,0-5,0 х 10⁹ /л. В синовиоцитограмме отмечалось появление и резкое увеличение ПЯН (11,6±0,51%), лимфоциты составляли в среднем 57,6±0,48%, мононуклеары - 40,9±0,37%. Среднее содержание белка было 37,0±0,49 г/л, глюкозы -4,2±0,04 µМ/л. В СЖ не были обнаружены какие-либо кристаллические образования (табл.3).

Таб. 3. Средние показатели СЖ у собак с моделированным ОА коленных суставов

Показатели	n=7 (М±m)
Количество	>> 1,0
Цвет	Бледно-розоватая (3) - Светло-желтая (4)
Прозрачность	Полупрозрачная (6) - Прозрачная (1)
Вязкость	Низкая (7)
Плотность МС	Рыхлый (7)
Цитоз, (х 10 9 /л)	4,0 - 5,0
Синовиоцитограмма,% : ПЯН Лимфоциты Мононуклеары	11,6 ± 0,51 (< 12%) 57,6±0,48 40,9±0,37
Общий белок, г/л	37,0±0,49
Глюкоза, µM/л	4,2±0,04
Кристаллы	Нет

Апробацию препарата «Хионат» проводили на 6-ти собаках с моделированным ОА коленных суставов. Трем собакам препарат вводили внутривенно, трем другим - внутрисуставно с интервалом 7 суток. Динамика изменения показателей синовиальной жидкости представлена в таблице 4.

Табл. 4.  Динамика показателей СЖ на фоне лечения препаратом Хионат

Показатели	Внутривенное введениеХионата (n=3)				Внутрисуставное введениеХионата (n=3)
№ инъекции	1	2	3	4	1	2	3	4
Количество	4,3 ±0,60	2,2 ±0,06	1,13 ±0,09	0,7 ±0,14	4,7 ±0,44	2,7 ±0,44	1,1 ±0,18	0,7 ±0,14
Цвет	Св.ж.	Б.роз.	Роз.	Б/ц	Св.ж.	Б.роз.	Б.роз.	Б/ц
Прозрачность	П/пр.	П/пр.	П/пр.	Пр.	П/пр.	П/пр.	П/пр.	П/пр.
Вязкость	Низк.	Низк.	Сред.	Сред.	Низк.	Низк.	Сред.	Сред.
Плотн. МС	Рыхл.	Рыхл.	У/пл.	Плот.	Рыхл.	Рыхл.	У/пл.	У/пл.
Цитоз, ( х10 9 /л)	15-25	5,5	5,83	7,0	5,5	7,5	9,0	5,33
Синовиогр.:
ПЯН	70,7±	2,3±	3,7±	1,3±	63,7±	9,7±	5,3±	1,7±
	0,33	0,88	0,88	0,33	0,88	1,45	0,88	0,33
Лимфоциты
	23,3±	83,3±	77,3±	74,0±	30,0±	82,3±	74,7±	72,7±
	0,33	4,41	1,45	0,58	0,58	0,88	0,88	0,88
Мононукл.
	6,0±	17,7±	19,0±	24,7±	6,3±	8,0±	20,0±	25,7±
	0,33	0,57	0,33	0,09	0,33	0,88	0,33	0,57
Общ. белок, г/л	36,7±	28,4±	28,4±	21,2±	35,8±	35,2±	31,4±	17,1±
	0,09	0,09	0,23	0,69	0,49	0,20	0,56	1,31
Глюкоза, µМ/л	4,1±	4,1±	-	4,3±	4,2±	4,3±	4,2±	4,2±
	0,03	0,02	-	0,12	0,09	0,06	0,12	0,09
Кристаллы	Нет	Нет	Нет	Нет	Нет	Нет	Нет	Нет

На фоне лечения препаратом Хионат отмечается нормализация основных показателей СЖ: уменьшение объема СЖ и количества содержащегося в ней общего белка до значений нормы, повышение вязкости, снижение % ПЯН и повышение плотности муцинового сгустка (табл.4).

Удалось установить, что резкое снижение объема СЖ как при внутривенном, так и при внутрисуставном введении препарата, отмечается уже после первой инъекции (Р<0,05) и длится на протяжении последующих двух (Р<0,001 при в/в и Р<0,05 при в/с). После третьей инъекции препарата статистически не отмечается снижение объема СЖ. Относительно динамики изменения процентного содержания ПЯН на фоне лечения, со статистической точки зрения резкое снижение количества ПЯН наблюдается только после первой инъекции (Р<0,01 при в/в и Р<0,001 при в/с введении Хионата), однако при в/с введении количество ПЯН снижается и после третьего введения препарата (Р<0,05). Хионат эффективно понижает содержание в СЖ общего белка (при в/в введении: после 1 и 3 инъекции Р<0,001; при в/с введении: после 2 инъекции Р<0,01 и после 3 инъекции Р<0,001). На основании проведенной статистической обработки полученных данных можно утверждать, что независимо от способа введения (в/венно или в/суставно) происходить уменьшение объема СЖ и количества содержащегося в ней общего белка до значений нормы, снижение процента ПЯН.

В контрольной группе животных через 4 недели после начала эксперимента аспирированная СЖ имела признаки слабо воспалительной синовии: низкая вязкость, рыхлый муциновый сгусток. В СЖ количество ПЯН составило 3%, лимфоцитов - 90%, мононуклеарных клеток - 7%. Уровень общего белка достигал 28,8 г/л (табл.5).

Табл. 5. Показатели СЖ в контрольной группе животных

Показатели	1 неделя	2 неделя	3 неделя	4 неделя
Объем	2,0	3,0	1,5	2,0
Цвет	Св.-желтая	Св.-желтая	Слегка розов.	Бледно-роз.
Прозрачность	Прозрачная	Полупрозрач.	Полупрозрач.	Полупрозрач.
Вязкость	Низкая	Низкая	Низкая	Средняя
Плотн. МС	Рыхлый	Рыхлый	Рыхлый	Ум.рыхлый
Цитоз, (х 10 9 /л)	5,0	4,5	1,0	6,5
Синовиоцито-грамма, %:
ПМЯ	1	5	0	3
Лимфоциты	95	92	91	90
Мононуклеары	4	3	9	7
Общий белок, г/л	35,2	34,8	28,8	28,8
Глюкоза,  µM/л	4,2	4,4	4,7	4,9
Кристаллы	Нет	Нет	Нет	Нет

Течение остеоартроза у собак и влияние Хионата на суставной хрящ изучали в биоптатах хряща, синовиальной оболочки и капсулы сустава.

У собак без патологии опорно-двигательного аппарата суставная поверхность покрыта широким слоем гиалинового хряща. На уровне хорошо представленной базофильной зоны хондроциты крупные, расположены в лакунах по несколько клеток. На поверхности хондроциты мелкие и расположены равномерно. При окраске пикрофуксином по ван Гизон определяется волокнистый каркас хряща. Кислые гликозаминогликаны выявляются хорошо по всей поверхности хряща.

На фоне в/венного введения препарата Хионат участок дефекта гиалинового хряща на 30 сутки замещается волокнистой соединительной тканью, содержащей большое количество фибробластов и незрелых коллагеновых волокон. Определяется незначительное количество сосудов венозного типа. Кислые гликозаминогликаны в данной локализации отсутствовали. Синовиальная оболочка была фиброзного типа и не имела каких-либо патологических изменений. Капсула также была в пределах нормы.

При в/с введении препарата дефект гиалинового хряща бедренной кости на 30 сутки наблюдения был замещен зрелой соединительной тканью с большим количеством коллагеновых волокон. Окраска толуидиновым синим не выявила накопление кислых гликозамингликанов. Были видны фрагменты хряща, «замурованные» в волокнистом каркасе. Синовиальная оболочка резко гипертрофирована и склерозирована. Кроющие синовиоциты дистрофичны. Отмечался выраженный ангиоматоз. Воспалительный лимфоцитарный инфильтрат виден во всех слоях синовии. Следует отметить преобладание фибробластической реакции в тканях коленного сустава при интраартикулярном введении препарата.

В контрольной группе на 30 сутки наблюдения в месте дефекта суставного хряща определяется большое количество фибробластов, коллагеновых волокон и тонкостенных сосудов. «Рубец» проникает до субхондральной кости. При окраске пикрофуксином для идентификации коллагена, было выявлено большое количество незрелой соединительной ткани желтого цвета. В капсуле коленного сустава выявлялись умеренные дистрофические изменения. Кроющие синовиоциты имели слабовыраженные признаки дистрофии. Определялось множество расширенных и полнокровных сосудов. Синовиальная оболочка резко гипертрофирована и склерозирована с наложениями фибрина. Кроющие синовиоциты, местами пролиферировали, формируя несколько рядов клеток.

Следует отметить, что изменения в контрольной группе и при интраартикулярном введении препарата Хионат стереотипны. Однако репаративные процессы после внутрисуставного введения препарата более выражены и характеризуются преобладанием фибробластической реакцией.

Сравнение морфологических изменений на 60 сутки наблюдения (при в/с введении и в контрольной группе) показало, что при интраартикулярном введении препарата дефект суставного хряща был заполнен зрелой соединительной тканью, в которой определяется большое количество хондроцитов, синтезирующих кислые гликозамингликаны с тенденцией формирования гиалинового хряща на фоне лечения. Дефект суставного хряща в контрольной группе замещается фиброзным хрящом, содержащим сосуды и большое количество фибробластов, однако, его выраженность меньше и на протяжении 60 суток остается без выраженной положительной динамики (гликозаминогликаны не синтезируются).

При в/в введении препарата морфологические изменения на месте дефекта суставного хряща через 30 и 60 суток идентичны, однако положительный эффект более выражен через 60 суток от начала эксперимента . Дефект замещается гиалиноподобным хрящом. Восстанавливается синтез кислых гликозамингликанов.

Основными клиническими симптомами гонартроза, моделированного или развившемся на фоне разрыва ПКС, дисплазии ТБС или расслаивающего остеохондрита головки плечевой кости, являются стартовые боли, возникающие при ходьбе, особенно при увеличении нагрузки на конечность, и хромота при движении. У собак с разрывом ПКС средние показатели реакция опоры больной тазовой конечности составила 92Н (2,0Н/кг массы), а среднее давление под стопой этой конечности 2,1Н/см ² при норме 120 - 122 Н (3,0 Н/кг) и 2,6 - 2,7 Н/см ² соответственно (Р<0,05). Перекат стопы у 90% (9 из 10) собак с дисплазией ТБС происходил медиолатерально (изнутри наружу). Основная нагрузка приходилась на латеральные фаланги IV и V - го пальцев. График реакции опоры носил одногорбый, ассиметричный характер. Пик графика смещен в начало периода переката, после чего наблюдалось плавное снижение кривой графика. Отмечено перераспределение нагрузки между грудными и тазовыми конечностями.

У собак с расслаивающим остеохондритом головки плечевой кости нагрузка на больную грудную конечность колебалась в пределах 162 - 166 Н, а среднее давление под кистью 2,5-2,9Н/см ² , при норме 185 - 188Н и 3,4 и 3,3 Н/см ² соответственно (Р<0,05).

После проведения курса лечения препаратом «Хионат» по сравнению с группой контроля (собаки которым проводили только оперативное лечение), отмечена более интенсивная динамика роста показателей реакции опоры и среднего давления под стопой и кистью, что способствовало восстановлению двугорбого графика реакции опоры тазовой конечности, и медиолатерального переката стопы тазовой конечности. Использование для реабилитации данного препарата сократило в среднем период реабилитации животных на 34±21 суток (Р<0,05).

Обсуждение результатов

Отсутствие аллергических реакций и изменений со стороны показателей крови при применении препарата Хионат обусловлено высшей степенью очистки препарата, исключающей контаминацию чужеродным белком. Это позволяет применять препарат не только внутрисуставно, но и внутривенно, что особенно эффективно при патологии суставов, артроцентез которых затруднен вследствие специфичной анатомии или темперамента животного.

При исследовании СЖ, полученной у животных без патологии опорно-двигательного аппарата (отсутствуют признаки артроза), были получены следующие результаты: объем СЖ - менее 1 мл, высокая вязкость, отсутствие ПЯН и преобладание лимфоцитов, содержание 15,8±0,60 г/л общего белка; эти данные согласуются с данными литературы ³ . Исследование СЖ у клинически больных животных с признаками вторичного ОА показало увеличение объема аспирированной СЖ, ее помутнение, снижение вязкости, полуторократное увеличение содержания общего белка, изменение клеточного состава (появление и увеличение % ПЯН), что подтверждает воспалительный характер изменения СЖ при артрозах. Это связано с тем, что при вторичном ОА поврежденные синовиоциты и/или хондроциты провоцируют выход катаболических ферментов, которые вызывают снижение содержания и деструкцию гиалуроната в СЖ и нарушают структуру других протеогликанов, регулирующих поток интерстициальной жидкости и обеспечивающих механические свойства суставного хряща. Потеря протеогликанов хряща при ОА уменьшает его прочность и приводит к дегенерации, что макроскопически проявляется узурацией суставного хряща и образованием остеофитов в краевой зоне суставной поверхности. Деполяризация гиалуроновой кислоты ведет к снижению вязкости СЖ. Появление ПЯН, синтезирующих медиаторы воспаления, приводит к деструкции гиалуроновой кислоты. На физиологическом уровне это проявляется изменением объема СЖ (синовит), помутнением, снижением вязкости, увеличением белка и появлением нейтрофилов.

У собак с моделированным ОА коленных суставов показатели СЖ сопоставимы с показателями СЖ, полученной у клинически больных животных. Это позволило провести апробацию Хионата на данной группе животных.

При в/венном и в/суставном введении препарата у экспериментальных животных отмечалась положительная динамика в снижении объема СЖ, в изменении цвета (от светло-желтого до бесцветного при в/в введении и до розоватого при в/с введении), прозрачности (от полупрозрачной до прозрачной), вязкости (от низкой до средней), синовиоцитограммы [постепенное снижение % нейтрофилов: при в/в - от 70,7±0,33% до 1,3±0,33% (Р<0,01); при в/с - от 63,7±0,88% до 1,7±0,33% (Р<0,001)] и в нормализации уровня биохимических показателей [снижение содержания общего белка в 1,7 раза при в/в введении (после 1 и 3 инъекции Р<0,001) и в 2,1 раза при в/с (после 2 инъекции Р<0,01 и после 3 инъекции Р<0,001)]. Показатели глюкозы незначительно колебались в пределах нормы, что говорит об отсутствии инфекционного процесса в полости сустава и данную патологию можно классифицировать, как остеоартроз.

На основании проведенной статистической обработки полученных данных можно утверждать, что независимо от способа введения (в/венное или в/суставное) происходить уменьшение объема СЖ и количества содержащегося в ней общего белка до значений нормы, а так же снижение ПЯН. Данная положительная динамика обусловлена противовоспалительным действием гиалуроната натрия, которое обусловлено ингибированием активности лизосомальньгх ферментов и окиси азота, снижением уровня интерлейкина-1 в синовиальной жидкости и блокированием образования супероксидных радикалов 6,10

В контрольной группе животных не отмечена положительная динамика изменения показателей СЖ. На протяжении всего эксперимента она имела слабо воспалительный характер (3% ПМЯ, 28,8 г/л белка, средняя вязкость).

К сожалению, из-за недостатка экспериментального материала нам не удалось провести статистическое сравнение показателей СЖ, полученной у животных в контрольной группе, с показателями СЖ у животных, прошедших курс лечения препаратом Хионат. Однако, на фоне лечения ОА препаратом Хионат, наблюдается положительная динамика изменения состава и реологических свойств СЖ. Создается впечатление, что улучшается метаболические процессы в суставных тканях: хряще и синовиальной мембране.

Морфогистологическое исследование ткани, образующейся на месте дефекта на 30 сутки, показало, что на фоне в/суставного введения препарата дефект суставного хряща замещается фиброзным хрящом, содержащим сосуды и большое количество фибробластов, а при в/венном - гиалиноподобным хрящом. Репаративные процессы при внутривенном введение препарата протекают с меньшим склерозом и поражением синовиальной оболочки. При изучении биоптатов ткани, заполнившей дефект суставного хряща на 60 сутки от начала эксперимента, отмечается выраженный положительный эффект и тенденция формирования гиалинового хряща. Анализ в/суставного введения препарата, подтверждает положительную динамику в формировании гиалинового хряща и синтеза кислых ГАГ на месте дефекта суставного хряща на 60 сутки наблюдения. В контрольной группе животных выраженность репаративных процессов снижена, дефект заполнен фиброзной тканью с большим количеством сосудов и фибробластов. С морфологической точки зрения в/венное введение препарата предпочтительнее. Но и при интраартикулярном введении, так же имеется значительный положительный эффект, но с отсрочкой во времени.

Морфологические исследования подтверждают анаболическое действие гиалуроната натрия, который является субстратом для синтеза гликозаминогликанов и, следовательно, протеогликанов хондроцитами. А также антикатаболическое действие, которое заключается в ингибировании катаболических ферментов (стромелизин, аггреканаза, коллагеназа и фосфолипаза) 6,10 . Именно эти фармакодинамические свойства способствуют замещению дефекта суставного хряща гиалиноподобным хрящом.

Исследования на силовой платформе показали, что у животных возрастает реакция опоры оперированной конечности и среднее давление под стопой. Это свидетельствует о том, что животные перестают «щадить» больную конечность. В группе собак с использованием Хионата в послеоперационном периоде динамика восстановления опорной и динамической функции конечности происходит в более короткие сроки. Важно, что у животных восстанавливается не только опорная, но и динамическая (отталкивающая) функция конечности, о чем свидетельствует восстановление второго пика на графиках реакции опоры и медиолатерального перекатастопы.

На наш взгляд это обусловлено восстановлением реологических свойств СЖ на фоне введения препарата Хионат, что улучшает её демпферную функцию. Так же период реабилитации собак с ОА может быть сокращен за счет противовоспалительного действия Хионата и более активной регенерации гиалиноподобного хряща в месте дефекта суставной поверхности.

Заключение

Препарат Хионат при внутривенном или внутрисуставном введении у собак с вторичным ОА способствует замещению дефектов суставного хряща гиалиноподобным хрящом и нормализует физические и биохимические показатели синовиальной жидкости.

Данный препарат может быть рекомендован собакам с вторичным ОА (на фоне дисплазии тазобедренных и локтевых суставов, расслаивающего остеохондрита, разрыва передней крестообразной связки, внутрисуставного перелома) в качестве монотерапии или в комбинации с другими препаратами при медикаментозном лечении, а также для ускорения периода реабилитации в послеоперационном периоде.

Список литературы

1. Борисов М.С.: Диагностика, лечение, профилактика закрытых и открытых повреждений суставов и сухожилий у животных: Автореферат дис.. .док. вет. наук. - М., 2001.
2. Ломницкий О.Я., Турчанинов P.O., Терновой Н.К.: Экспериментальное изучение деформирующего остеоартроза. // Ревматология.-1986 - №4 - С.65-67.
3. Лузин В.Н.: Материалы к синовиоцитограмме коленных суставов человека и животных в норме и некоторых патологических состояниях. // Ярославль, 1968.
4. Лучихина Л.В.; Артроз: ранняя диагностика и патогенная терапия. // «Медицинская энциклопедия», М., 2001.
5. Ягников С.А., Митин В.Н.: Консервативное лечение остеоартроза крупных суставов у собак. // Ж. Вестник ветеринарной медицины. 2004, №1, 7-10.
6. Anderson M.A.: Oral Chondroprotective Agents. Part II.// Compendium 1999, 7, p.21.
7. Hantzshel H.: Leas synoviale system und seine Bedeutung bei chronish rheumatischen Erkrankungen.// Liss - Leipzig, 1978.
8. Huttl S.: Sinovial Fluid.// Acta rheun. balneol (Pistiana) - 1970, v.5 (p.I) v.6 (p.II).
9. Ropes M.W., Bauer W.: Synovial fluid changes in joint disease.// Cambridje, 1953.
10. Sevalla K.: Effect of Polysulfated Glycosaminoglycan on DNA Content and proteoglycan Metabolism in Normal and Osteoarthritic Canine Articular Cartilage Explants. // Veterinary Surgery 2000, 5, p.407-417.